抗疫醫(yī)生論文賞析八篇

發(fā)布時(shí)間：2022-09-19 16:18:25

序言：寫(xiě)作是分享個(gè)人見(jiàn)解和探索未知領(lǐng)域的橋梁，我們?yōu)槟x了8篇的抗疫醫(yī)生論文樣本，期待這些樣本能夠?yàn)槟峁┴S富的參考和啟發(fā)，請(qǐng)盡情閱讀。

抗疫醫(yī)生論文

第1篇

一、正確處理現(xiàn)實(shí)自我和理想自我的矛盾

現(xiàn)實(shí)自我是個(gè)體對(duì)當(dāng)前自我狀況的認(rèn)識(shí)和評(píng)價(jià)，理想自我則是個(gè)體期望達(dá)到的自我狀況。二者之間的差距，既是個(gè)體進(jìn)步和完善的動(dòng)力，也是青少年煩惱的重要根源。大學(xué)生是一個(gè)抱負(fù)水平相對(duì)較高的群體，現(xiàn)實(shí)自我和理想自我之間的差距短時(shí)間難以彌補(bǔ)，導(dǎo)致一部分大學(xué)生產(chǎn)生自卑和自責(zé)情緒，或者沉湎于好高騖遠(yuǎn)，難以踏實(shí)做事的虛幻自信中。合理解決現(xiàn)實(shí)自我和理想自我的矛盾，根據(jù)學(xué)生的不同情況，可采取以下三種可能的調(diào)整策略：

（一）努力改善現(xiàn)實(shí)自我，使其逐漸接近理想自我

這是最為積極同時(shí)也是最有難度的協(xié)調(diào)策略，要求學(xué)生基于對(duì)現(xiàn)實(shí)自我的客觀認(rèn)識(shí)，確立切實(shí)可以達(dá)到的理想自我，并具體化為可操作的目標(biāo)，通過(guò)頑強(qiáng)的意志努力使現(xiàn)實(shí)自我走向完善。

（二）基本放棄理想自我而遷就現(xiàn)實(shí)自我

我們必須客觀地看到，大學(xué)生群體是有著巨大的個(gè)別差異的，其中有些個(gè)體既沒(méi)有過(guò)人的才能，也沒(méi)有其他突出的優(yōu)點(diǎn)，他們是大學(xué)校園中的相對(duì)弱勢(shì)群體。受到整個(gè)大學(xué)生群體較高的理想自我的影響，這些人的現(xiàn)實(shí)自我和理想自我的矛盾更加突出，而且由于其自身能力的局限，很難達(dá)到理想自我。他們所能做的，是基本放棄理想自我，接納現(xiàn)實(shí)自我，盡自己所能做得更好，學(xué)會(huì)與自己的過(guò)去作“縱向比較”中來(lái)確立自我信心，擺脫與他人進(jìn)行“橫向比較”而帶來(lái)的自我傷害感，獲得平常心，平靜而踏實(shí)地面對(duì)生活應(yīng)該成為這部分大學(xué)生健康的自我觀念。

二、展示自我和封閉自我的矛盾

大學(xué)文化是一種多元化的文化，給學(xué)生展示個(gè)人風(fēng)采提供了許多機(jī)會(huì)，同時(shí)展示自我和封閉自我的矛盾也凸現(xiàn)出來(lái)：成功的個(gè)人展示可以使大學(xué)生在他人的贊賞中獲得個(gè)人信心和自我價(jià)值感，但展示中的挫折和失敗也可能傷及自尊和自信；而封閉自我，深居簡(jiǎn)出，默默無(wú)聞,自我是安全的，同時(shí)也是孤獨(dú)的，自我的無(wú)價(jià)值感常常困擾著試圖封閉自我的大學(xué)生。面對(duì)著兩難情境，大學(xué)生往往無(wú)所適從。

解決這一矛盾的關(guān)鍵，要求大學(xué)生完成由關(guān)注“他人評(píng)價(jià)”模式向關(guān)注“自我評(píng)價(jià)”模式的轉(zhuǎn)化，形成正確的理念：參與豐富多彩的校園文化活動(dòng)，是為了對(duì)自我的發(fā)現(xiàn)和發(fā)展，尋找成功和愉快體驗(yàn)，而不是為了得到別人的喝彩。在這樣的理念支配下，可讓大學(xué)生更加放松地發(fā)揮自己的潛能，并在一系列失敗和成功的嘗試中獲得個(gè)人成長(zhǎng)。

三、確立獨(dú)立自信的自我，擺脫成長(zhǎng)中的煩惱

根本解決現(xiàn)實(shí)自我和理想自我的矛盾，展示自我和封閉自我的沖突，需要擺脫自我形成過(guò)程中的外部依賴，確立獨(dú)立自信的自我。

（一）獨(dú)立于他人評(píng)價(jià)，接納現(xiàn)實(shí)自我

大學(xué)生常常把他人評(píng)價(jià)作為自我的標(biāo)準(zhǔn)，過(guò)多關(guān)注是否符合別人的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)導(dǎo)致的自我不確定性是煩惱的重要來(lái)源，而健康和成熟的自我最重要的特征是獨(dú)立于他人評(píng)價(jià)，能夠基于個(gè)人經(jīng)驗(yàn)完成對(duì)現(xiàn)實(shí)自我的客觀評(píng)價(jià)和認(rèn)識(shí)，坦然地接納自己。因此，實(shí)現(xiàn)由外在評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)向內(nèi)心評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)的轉(zhuǎn)化，才能獲得對(duì)自我的信心和個(gè)人成長(zhǎng)的愉快體驗(yàn)。

（二）獨(dú)立于社會(huì)壓力，完成自我與社會(huì)的協(xié)調(diào)

學(xué)校教育以正面引導(dǎo)為主流，社會(huì)對(duì)大學(xué)生群體在才學(xué)、品德、能力等方面都有著較高期望，這些期望與大學(xué)生的實(shí)際行為往往形成一定的反差，大學(xué)生自我發(fā)展中的部分焦慮來(lái)源于這種社會(huì)壓力，常常感覺(jué)自己的所作所為不符合大學(xué)生的形象，因此產(chǎn)生自責(zé)和罪惡感。擺脫這種困擾，需要大學(xué)生在社會(huì)要求和個(gè)人能力之間學(xué)會(huì)靈活和折衷，接受自己個(gè)性中某些不為社會(huì)贊賞和肯定的方面，揚(yáng)長(zhǎng)避短，不勉強(qiáng)自己屈從社會(huì)壓力，應(yīng)該認(rèn)識(shí)到，在不妨礙社會(huì)和他人的前提下，成熟和獨(dú)立的自我應(yīng)該具有靈活性和適應(yīng)性，一個(gè)人也不需要在所有方面都得到社會(huì)的認(rèn)可和贊賞。本著這樣獨(dú)立于社會(huì)壓力的理念，大學(xué)生可以更好地張揚(yáng)個(gè)性中積極的方面，淡化消極個(gè)性因素帶來(lái)的心理困擾，完成自我與社會(huì)的協(xié)調(diào)統(tǒng)一。

參考文獻(xiàn)

第2篇

【關(guān)鍵詞】抗生素的糖基轉(zhuǎn)移酶抗生素糖苷糖基化

Recentadvancesinantibioticglycosyltransferases

ABSTRACTGlycosideantibiotics,acategoryofcompoundswidelyusedclinicallyforantibacterialandanticancer,arecatalyzedbyantibioticglycosyltransferases(Gtfs)invivo.ThesugarmoietiesaretransferredtothecorrespondingaglyconbyGtfs,oftenworkatverylatestagesofbiosynthesisofantibiotics.Theposition,typeandnumberofsugarmoietiesincorporatedtotheantibioticshavegreatimpactonitsbioactivity.Thisarticleprovidesanoverviewofthecategories,functions,characteristicsofGtfs,theirapplicationsincombinatorialbiosynthesis,andtheprospectsforresearch.

KEYWORDSAntibioticglycosyltransferase;Glycosideantibiotics;Glycosylation

抗生素糖苷在臨床上主要用于抗菌和抗腫瘤，在抗生素生物合成基因簇中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了很多編碼糖基轉(zhuǎn)移酶的基因［1］，但人們對(duì)抗生素糖基轉(zhuǎn)移酶(antibioticglycosyltransferases，Gtfs)的特異性和催化機(jī)制了解不多。糖基與不同配基的結(jié)合能大大增加天然產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)多樣性，在功能上，這些糖組分通常參與目的細(xì)胞的分子識(shí)別，影響化合物的生物活性［2］。目前，隨著抗生素的廣泛使用，耐藥菌也在逐年增加，迫切需要尋找新的抗生素來(lái)與之抗衡。通過(guò)糖基化增加抗生素種類和改變抗生素活性是一條很有前景的途徑，探討糖苷類抗生素的產(chǎn)生機(jī)制和糖基轉(zhuǎn)移酶的催化特征，有望為發(fā)現(xiàn)和改造新活性的抗生素奠定基礎(chǔ)。

1糖苷類抗生素

很多糖苷類抗生素在生物合成中經(jīng)過(guò)了立體和區(qū)域選擇性的糖基化，在這一生物反應(yīng)中，糖基轉(zhuǎn)移酶催化其結(jié)構(gòu)中的糖基以單糖、雙糖和寡糖鏈的形式結(jié)合到配基上從而形成特定的C、N和O苷(Fig.1)。糖苷類抗生素的生物合成途徑中，糖基化通常是后修飾的最后一步，如萬(wàn)古霉素(vancomycin)、替考拉寧(teicoplanin)的糖鏈都是在生物合成的最后引入的［3］。Fig.1TheC,NandOglycosideantibiotics

糖苷類抗生素的作用機(jī)制主要有兩類，一類是通過(guò)抑制革蘭陽(yáng)性菌肽聚糖的合成，如雷莫拉寧(ramoplanin)［4］；另一類是抑制DNA促旋酶的活性，如新生霉素(novobiocin)［5］。

2糖苷類抗生素中糖基的主要作用

糖基化的作用和意義主要體現(xiàn)在以下三個(gè)方面：第一，增加化合物的水溶性。己糖衍生物結(jié)合到抗生素糖苷配基上，增加了抗生素的親水性利于藥效的發(fā)揮，典型的有替考拉寧環(huán)七肽上的N乙酰葡萄糖胺(Nacetylglucosamine，GlcNAc)和雷莫拉寧骨架上的甘露糖鏈；第二，利于分泌。A40926生物合成途徑中的甘露糖基轉(zhuǎn)移酶(mannosyltransferase)特異識(shí)別mannosylPPC55作為糖供體，使糖基化的抗生素利于分泌［6］。第三，糖基化是產(chǎn)生菌的一種自我保護(hù)機(jī)制。在竹桃霉素(oleandomycin)的產(chǎn)生過(guò)程中，糖基轉(zhuǎn)移酶OleD使中間態(tài)抗生素糖基化，造成其在胞內(nèi)短暫失活，抗生素分泌后，再由糖苷酶水解去除糖基，使其恢復(fù)活性［7］。該機(jī)制在大環(huán)內(nèi)酯類抗生素中比較常見(jiàn)，類似功能的酶還有MgtA［8］。

3糖基轉(zhuǎn)移酶

糖基轉(zhuǎn)移酶在生物體內(nèi)催化活化的糖連接到不同的受體分子，如蛋白、核酸、寡糖、脂和小分子上，糖基化的產(chǎn)物具有很多生物學(xué)功能。在不同的Gtfs家族中存在一類與抗生素生物合成相關(guān)的Gtfs，它的功能是在抗生素生物合成的后期使其糖基化，通過(guò)糖的位置、類型和數(shù)量的改變對(duì)抗生素的活性進(jìn)行調(diào)節(jié)。

隨著對(duì)抗生素生物合成基因簇的深入研究，從放線菌中已經(jīng)分離了100多個(gè)抗生素生物合成相關(guān)的糖基轉(zhuǎn)移酶基因，序列分析表明這些基因編碼的蛋白都屬于糖基轉(zhuǎn)移酶家族。大多數(shù)糖基轉(zhuǎn)移酶基因都具有靠近C端的富含甘氨酸(glycinerich)的保守區(qū)，該保守區(qū)也存在于UDP糖基和UDP葡糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶中。選擇GenBank中注冊(cè)的有代表性119條糖基轉(zhuǎn)移酶序列，用PAUP4.0軟件進(jìn)行系統(tǒng)分析，以近鄰法構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)(Fig.2)。進(jìn)化樹(shù)的分析結(jié)果表明，糖基轉(zhuǎn)移酶基因之間親緣關(guān)系的遠(yuǎn)近，并不能很準(zhǔn)確的推斷其生物學(xué)功能［9］，例如，EryCⅢ和MegCⅢ，在氨基酸水平上具有83.4%的一致性，能識(shí)別同樣的配基，UrdGT1b和UrdGT1c表現(xiàn)出了很高的同源性(具有91%一致的氨基酸和僅在31個(gè)氨基酸區(qū)域內(nèi)有幾個(gè)不同的氨基酸)，但是它們卻轉(zhuǎn)運(yùn)不同的己糖，UrdGT1c轉(zhuǎn)移L夾竹桃糖(Lrhodinose)，UrdGT1b轉(zhuǎn)移D橄欖糖(Dolivose)［10］。催化CC、CN與CO糖苷鍵形成的糖基轉(zhuǎn)移酶，在基因的序列和氨基酸水平上并沒(méi)有明顯的差異，如Asm25(安絲菌素酰胺糖苷生物合成途徑中催化CN糖苷形成的Gtfs)［9，11］、UrdGT2(烏達(dá)霉素生物合成途徑中催化CC糖苷形成的Gtfs)［12］、GtfB(萬(wàn)古霉素生物合成后修飾中催化CO糖苷形成的Gtfs)［13］。

在萬(wàn)古霉素的后修飾過(guò)程中，糖基轉(zhuǎn)移酶GtfB的Fig.2Adendrogramofdifferentantibioticglycosyltransferases功能是將UDP葡萄糖中的葡萄糖基轉(zhuǎn)移到萬(wàn)古霉素的骨架上，對(duì)其晶體結(jié)構(gòu)的研究表明，該酶具有兩個(gè)結(jié)構(gòu)域，存在于中間區(qū)域的溝可能包含UDP葡萄糖的結(jié)合區(qū)域［13］。糖基轉(zhuǎn)移酶的結(jié)構(gòu)測(cè)定將有助于我們深入研究其催化特異性。

Gtfs的兩個(gè)顯著特征是：第一，在抗生素生物合成過(guò)程最后起作用，這一點(diǎn)使其在組合生物合成中能得到靈活的應(yīng)用，其底物結(jié)構(gòu)特異性的闡明可以為新結(jié)構(gòu)和新功能化合物的發(fā)現(xiàn)奠定基礎(chǔ)。Gtfs催化的糖基轉(zhuǎn)移反應(yīng)中，己糖的C1通過(guò)三磷酸核苷的去磷酸來(lái)激活，從而在親電子的C1位置上捕獲糖基底物，然后經(jīng)親核攻擊，與糖苷配基的羥基結(jié)合。第二，大部分的糖基轉(zhuǎn)移酶可以催化活化的己糖結(jié)合到糖苷配基底物的羥基上，形成CO糖苷，僅少數(shù)例外，如在rebeccamycin［14］和urdamycin［13］的衍生物中存在糖基通過(guò)CN和CC鍵與糖苷配基結(jié)合的化合物。安絲菌素的YMG平板培養(yǎng)發(fā)酵物分離得到了安絲菌素酰胺N糖苷類化合物，其結(jié)構(gòu)中的糖基通過(guò)酰胺鍵上的N與糖苷配基骨架相連［11］。在urdamycin的生物合成中，可能是由于親核的C原子和酚類的羥基處于鄰位導(dǎo)致CC糖苷鍵的形成［12］，但是催化CN和CC形成的糖基轉(zhuǎn)移酶其特異性還沒(méi)有得到深入的研究。

3.1Gtfs的應(yīng)用研究

(1)生物體內(nèi)的研究Gtfs的體內(nèi)研究主要采用遺傳學(xué)方法進(jìn)行，一種方法是通過(guò)質(zhì)粒介導(dǎo)的基因替代宿主菌自身的TDP去氧己糖合成酶基因，篩選到的突變體作細(xì)胞工廠用于抗生素的改造。這些研究包括工程化的daunomycin(道諾霉素)［15］途徑用于苦霉素(pikromycin)產(chǎn)生菌S.venezuleae和urdamycin的產(chǎn)生菌S.fradiae中生產(chǎn)4′差向異構(gòu)的糖基和具有不同糖單元的蒽環(huán)類抗生素［16，17］。

另外一種方法是在不同的宿主中異位表達(dá)Gtfs，這方面的例子包括在宿主S.erythraea中表達(dá)oleGII基因產(chǎn)生3Orhamnosyl6DEB、表達(dá)tylM2基因產(chǎn)生5Odesosaminyl(tylactone)［18］。

研究表明Gtfs對(duì)不同的糖分子具有底物適應(yīng)性，Salas的研究組創(chuàng)造出了共表達(dá)系統(tǒng)，該系統(tǒng)把來(lái)源于elloramycin生物合成基因簇中的糖基合成基因盒(Cassette)和糖基轉(zhuǎn)移酶基因elMGT在一起成功地表達(dá)［19］。盡管很多糖基轉(zhuǎn)移酶的底物廣譜性已得到了證明，但仍有很多文獻(xiàn)還是報(bào)道了特異性的糖基轉(zhuǎn)移酶基因的存在，例如，C.cyanogenus中的UrdGT2［20］和來(lái)自S.spheroidNCIMB11891的NovM［21］。勿庸置疑，隨著更多Gtfs編碼基因被發(fā)現(xiàn)以及作用機(jī)制的深入研究，在生物體內(nèi)進(jìn)行抗生素糖基化修飾的策略和模式也會(huì)增加。因此，建立多樣化的微生物工廠來(lái)生產(chǎn)不同糖基修飾的天然產(chǎn)物，如表達(dá)糖基化修飾的聚酮(PK)，非核糖體肽(NRP)和雜合的PK/NRP類抗生素，可以為篩選新活性化合物提供可能。

(2)Gtfs的體外研究Gtfs的體外研究依賴有活性的Gtfs、多樣化的糖苷配基和糖基供體。由于抗生素糖基轉(zhuǎn)移酶在體內(nèi)含量很低，異源表達(dá)操作相對(duì)簡(jiǎn)便，所以研究者多以異源表達(dá)方式在微生物如E.coli或者S.lividans中進(jìn)行異源表達(dá)獲得［22］。已經(jīng)有幾個(gè)成功的例子，如NovM首次在S.spheroides中發(fā)現(xiàn)并克隆，并以活性形式在E.coli中表達(dá)和純化［21］。通過(guò)化學(xué)合成和生物酶催化的方法來(lái)產(chǎn)生TDPD葡萄糖都是可能的［23］。比較而言糖苷配基最容易得到，可以通過(guò)母體抗生素的降解控制其產(chǎn)生，如相應(yīng)糖苷配基很容易從萬(wàn)古霉素和替考拉寧分別獲得，novobiocicacid可以從酸催化新生霉素的反應(yīng)中獲得。除此之外，不同的配基還可以通過(guò)全合成或部分修飾來(lái)得到。如化學(xué)合成daunomycin、carminomycin(洋紅霉素)和博來(lái)霉素(bleomycin)的衍生物［23～25］。

4糖基轉(zhuǎn)移酶在組合生物合成的應(yīng)用

應(yīng)用遺傳學(xué)方法生產(chǎn)新型聚酮和多肽類化合物日益得到人們的重視，表面上看重組生物合成糖基化的化合物和聚酮、多肽一樣復(fù)雜，但是和聚酮、多肽合成酶的復(fù)雜性相比，由于催化去氧糖產(chǎn)生的酶及其反應(yīng)機(jī)制比較保守，因此重組合成糖基化的化合物更有實(shí)踐意義［25］。

西班牙的Salas研究組已經(jīng)建立了成功的基因克隆和表達(dá)系統(tǒng)用來(lái)生產(chǎn)活化的去氧糖，目的基因處于操縱子的下游，通過(guò)啟動(dòng)子的控制可以在鏈霉菌中表達(dá)。在鏈霉菌Streptomycesalbus中整合糖基轉(zhuǎn)移酶基因oleGII，導(dǎo)入合成L夾竹桃糖(Loleandrose)的質(zhì)粒后，合成紅霉素內(nèi)酯B(erythronolideB)，而整合糖基轉(zhuǎn)移酶基因elmGT后再導(dǎo)入生物合成L橄欖糖(Lolivose)的質(zhì)粒pOLV可以成功生產(chǎn)特曲霉素(tetracenomycinC)［26，27］。

Staurosporine(十字孢堿)類化合物的結(jié)構(gòu)是由一個(gè)糖分子和一個(gè)雜環(huán)的吲哚卡唑單元組成，通過(guò)化學(xué)手段較難得到，通過(guò)在一個(gè)生物體內(nèi)共表達(dá)rebeccamycin和其它staurosporine類化合物生物合成基因，分離鑒定了大約產(chǎn)生了30種staurosporine類衍生物［28］。通過(guò)遺傳學(xué)方法改變Gtfs的特異性有一定難度，Salas研究組通過(guò)共表達(dá)糖基生物合成基因盒、Gtfs基因(staN和staG)和staurosporine的生物合成基因成功地替代了天然附加在吲哚卡唑基團(tuán)上的糖基，為糖基轉(zhuǎn)移酶在重組生物合成中的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)，證明重組生物合成在生產(chǎn)新的糖基化產(chǎn)物中較藥用化學(xué)更有利［16］。

4.1使用產(chǎn)生菌作為細(xì)胞工廠

用產(chǎn)生糖苷化合物的微生物作為細(xì)胞工廠，在基因的編碼區(qū)通過(guò)插入抗生素抗性標(biāo)記或刪除部分基因進(jìn)行敲除產(chǎn)生突變體，引入外源糖基轉(zhuǎn)移酶基因，使其利用細(xì)胞內(nèi)活化的糖分子和微生物次生代謝的中間體合成新的抗生素。這種方法已經(jīng)在很多生產(chǎn)菌株如紅霉素(erythromycin)［29］、普卡霉素(plicamycin)、urdamycin、酒霉素(methymycin)［29］和苦霉素(pikromycin)上得到應(yīng)用［30］。

另外一種促使不同糖單元結(jié)合到配基上的策略是在產(chǎn)生類似生物活性化合物的有機(jī)體上異源表達(dá)Gtfs，宿主作為細(xì)胞工廠提供核苷激活的糖源。配基骨架可以由宿主合成，也可以通過(guò)控制宿主的染色體基因和外源基因來(lái)合成，或者用化合物進(jìn)行飼喂。通過(guò)把來(lái)源于萬(wàn)古霉素產(chǎn)生菌A.orientalis的基因gtrE在不產(chǎn)生糖基多肽A47934的鏈霉菌S.toyocaensis中進(jìn)行表達(dá)，形成了新的糖基A47934衍生物［17］。

Gtfs轉(zhuǎn)運(yùn)不同的糖到配基骨架的特定C原子上，而用基因工程的方法改變糖在骨架上的位置更有意義，這一設(shè)想成功產(chǎn)生了雜合的urdamycin和普卡霉素抗腫瘤藥物［30］。

4.2使用非產(chǎn)生菌作為細(xì)胞工廠

在重組菌株的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中，由于宿主不產(chǎn)生配基骨架，需要整合一個(gè)具有配基骨架生物合成基因的質(zhì)粒到宿主上或者把配基添加到培養(yǎng)基中，通過(guò)生物轉(zhuǎn)化進(jìn)行修飾。糖分子則是通過(guò)轉(zhuǎn)移一個(gè)或多個(gè)含有必須基因的質(zhì)粒來(lái)提供，現(xiàn)在一些可以合成不同去氧己糖的質(zhì)粒已經(jīng)作為一種重要的工具被開(kāi)發(fā)出來(lái)［31］。

5糖基轉(zhuǎn)移酶的研究前景

最近，在糖肽的生物合成系統(tǒng)中得到了Gtfs的晶體，結(jié)構(gòu)測(cè)定表明這類Gtfs家族有兩個(gè)共同的結(jié)構(gòu)域。NDP糖結(jié)合到C端，糖苷配基結(jié)合到N端(AGV/GtfB，DVV/GtfA)［13］。這個(gè)兩裂的結(jié)構(gòu)僅僅由兩個(gè)肽連接到一起，提示混合和匹配各自的結(jié)構(gòu)域是可以實(shí)現(xiàn)的［32，33］。因此，DNAshuffling或相關(guān)酶定向進(jìn)化可以構(gòu)建看似荒誕的Gtfs，改變其對(duì)己糖單元和配基的底物特異性，大大提高糖苷類化合物的結(jié)構(gòu)多樣性，為篩選到新活性糖苷類抗生素奠定基礎(chǔ)。

總之，在生物合成中研究糖基化模式的多樣性需要滿足三個(gè)要求。

(1)建立糖基轉(zhuǎn)移酶庫(kù)通過(guò)重組生物合成生產(chǎn)新的抗生素糖苷，必須建立糖基轉(zhuǎn)移酶的基因庫(kù)，才能使之在工業(yè)上得到深入應(yīng)用。隨著更多基因簇的序列測(cè)定，Gtfs的數(shù)目也會(huì)逐年增加，發(fā)現(xiàn)具有混合和匹配的N或C端的Gtfs區(qū)域用于構(gòu)建雜合催化體系，改變配基和去氧糖的識(shí)別，可以為特定的去氧糖單元尋找新結(jié)合位點(diǎn)［34］。

(2)建立配基的化合物庫(kù)這些化合物包括簡(jiǎn)單的氨基香豆素類骨架(aminocoumarinscaffolds)、非核糖體肽(NRP)以及芳香化的聚酮配基［25］。但是，由相似酶催化進(jìn)行CN，CC糖基化還有待于進(jìn)一步的研究。

(3)建立糖供體的化合物庫(kù)糖供體要包括很多UDP或TDP活化的糖和去氧糖。天然去氧糖附加到配基上以后，賦予了配基新的活性。去氧糖的氨甲酰化在很多類型的化合物如聚酮(新生霉素)、非核糖體肽(如替考拉寧)等抗生素中都存在，因此所有TDPD和TDPL去氧己糖衍生物在庫(kù)中都值得準(zhǔn)備［32，33］。

6總結(jié)

迄今為止已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了很多與抗生素生物合成相關(guān)的糖基轉(zhuǎn)移酶，但現(xiàn)有的研究還不深入，對(duì)糖基化生物學(xué)意義、糖基轉(zhuǎn)移酶結(jié)構(gòu)和功能關(guān)系、催化機(jī)制、糖苷的活化形式以及組合生物合成的應(yīng)用等有待進(jìn)一步探討。沈月毛研究組發(fā)現(xiàn)糖苷化與微生物的生長(zhǎng)條件有關(guān)，同一個(gè)菌株在平板培養(yǎng)時(shí)產(chǎn)生的糖基化產(chǎn)物在液體培養(yǎng)時(shí)卻檢測(cè)不到。催化三種不同類型糖苷形成的糖基轉(zhuǎn)移酶之間在其作用機(jī)制及底物選擇性方面到底存在那些異同，都有賴于不同類型糖基轉(zhuǎn)移酶高級(jí)結(jié)構(gòu)的闡明，離實(shí)用化、產(chǎn)業(yè)化還有很長(zhǎng)的一段路要走。

【參考文獻(xiàn)】

［1］ThorosonJS,HosterTJ,JiangJ,etal.Nature′scarbohydratechemists:theenzymaticglycosylationofbioactivebacterialmetabolites［J］.CurrOrgChem,2001,5(2):139

［2］WeymouthWilsonAC.Theroleofcarbohydratesinbiologicallyactivenaturalproducts［J］.NatProdRep,1997,14(2):99

［3］LoseyHC,PeczuhMW,ChenZ,etal.Tandemactionofglycosyltransferasesinthematurationofvancomycinandteicoplaninaglycones:novelglycopeptides［J］.Biochemistry,2001,40(15):4745

［4］CudicP,KranzJK,BehennaDC,plexationofpeptidoglycanintermediatesbythelipoglycodepsipeptideantibioticramoplanin:minimalstructuralrequirementsforintermolecularcomplexationandfibrilformation［J］.ProcNatlAcadSci,2002,99(11):7384

［5］GellertM,O′DeaMH,ItohT,etal.NovobiocinandcoumermycininhibitDNAsupercoilingcatalyzedbyDNAgyrase［J］.ProcNatlAcadSci,1976,73(12):4474

［6］SosioM,StinchiS,BeltramettiF,etal.ThegeneclusterforthebiosynthesisoftheglycopeptideantibioticA40926bynonomuraeaspecies［J］.ChemBiol,2003,10(6):541

［7］QuirosLM,AguirrezabalagaI,OlanoC,etal.TwoglycosyltransferasesandaglycosidaseareinvolvedinoleandomycinmodificationduringitsbiosynthesisbyStreptomycesantibioticus［J］.MolMicrobiol,1998,28(6):1177

［8］GourmelenA,BlondeletRouaultMH,PernodetJL.Characterizationofaglycosyltransferaseinactivatingmacrolides,encodedbygimAfromStreptomycesambofaciens［J］.AntimicrobAgentsChemother,1998,42(10):2612

［9］代煥琴.安絲菌素生物合成的后修飾研究［D］.中國(guó)科學(xué)院博士學(xué)位論文，2006：40

［10］WalshCT,LoseyHC,FreelCL.Antibioticglycosyltransferases［J］.BiochemSocTrans,2003,31(Pt3):487

［11］LuC,BaiL,ShenY.AnovelamideNglycosideofansamitocinsfromActinosynnemapretiosum［J］.JAntibiot,2004,57(5):348

［12］HoffmeisterD,IchinoseK,BechtholdA.Twosequenceelementsofglycosyltransferasesinvolvedinurdamycinbiosynthesisareresponsibleforsubstratespecificityandenzymaticactivity［J］.ChemBiol,2001,8(16):557

［13］MulichakAM,LoseyHC,WalshCT,etal.StructureoftheUDPglucosyltransferaseGtfBthatmodifiestheheptapeptideaglyconeinthebiosynthesisofvancomycingroupantibiotics［J］.Structure,2001,9(7):547

［14］SanchezC,ButovichIA,BranaAF,etal.Thebiosyntheticgeneclusterfortheantitumorrebeccamycin:characterizationandgenerationofindolocarbazolederivatives［J］.ChemBiol,2002,9(4):519

［15］OttenSL,LiuX,FergusonJ,etal.CloningandcharacterizationoftheStreptomycespeucetiusdnrQSgenesencodingadaunosaminebiosynthesisenzymeandaglycosyltransferaseinvolvedindaunorubicinbiosynthesis［J］.JBacteriol,1995,177(22):6688

［16］ZhaoY,AhlertJ,XueY,etal.Engineeringamethymycin/pikromycincalicheamicinhybrid:constructionoftwonewmacrolidescarryingadesignedsugarmoiety［J］.JAmChemSoc,1999,121(42):9881

［17］HoffmeisterD,IchinoseK,DomannS,etal.TheNDPsugarcosubstrateconcentrationandtheenzymeexpressionlevelinfluencethesubstratespecificityofglycosyltransferases:cloningandcharacterizationofdeoxysugarbiosyntheticgenesoftheurdamycinbiosyntheticgenecluster［J］.ChemBiol,2000,7(11):821

［18］WalshC,FreelCL,LoseyHC.Antibioticglycosyltransferases:antibioticmaturationandprospectsforreprogramming［J］.JMedChem,2003,46(16):3425

［19］BlancoG,PatalloEP,BranaAF,etal.IdentificationofasugarflexibleglycosyltransferasefromStreptomycesolivaceus:theproduceroftheantitumorpolyketideelloramycin［J］.ChemBiol,2001,8(3):253

［20］DürrC,HoffmeisterD,WohlertSE,etal.TheglycosyltransferaseUrdGT2establishesbothCandOglycosidicbonds［J］.Angewandte,2004,43(22):2962

［21］FreelCL,AndersonJW,KahneD,etal.InitialcharacterizationofnovobiocicacidnoviosyltransferaseactivityofNovMinbiosynthesisoftheantibioticnovobiocin［J］.Biochemistry,2002,42(14):4179

［22］MendezC,SalasJA.Alteringtheglycosylationpatternofbioactivecompounds［J］.TrendsBiotechnol,2001,19(11):449

［23］HeX,MLiu,HW.Formationofunusualsugars:mechanisticstudiesandbiosyntheticapplications［J］.AnnuRevBiochem,2002,71:701

［24］OberthurM,LeimkuhlerC,KrugerRG,etal.Asystematicinvestigationofthesyntheticutilityofglycopeptideglycosyltransferases［J］.JAmChemSoc,2005,127(30):10747

［25］WohlertSE,BlancoG,LomboF,etal.Novelhybridtetracenomycinsthroughcombinatorialbiosynthesisusingaglycosyltransferaseencodedbyelmgenesincosmid16F4andwhichshowsabroadsugarsubstratespecificity［J］.JAmChemSoc,1998,120(41):10596

［26］SalasJA,MendezC.Biosynthesispathwaysfordeoxysugarsinantibioticproducingactinomycetes:isolation,characterizationandgenerationofnovelglycosylatedderivatives［J］.JMolMicrobiolBiotechnol,2005,9(2):77

［27］SanchezC,ZhuL,BranaAF,binatorialbiosynthesisofantitumorindolocarbazolecompounds［J］.ProcNatlAcadSci,2005,102(2):461

第3篇

中醫(yī)防疫再度進(jìn)入公眾視野

早在4月30日，中國(guó)衛(wèi)生部部長(zhǎng)陳竺就在新聞會(huì)上風(fēng)趣地說(shuō)：“我們不但有衛(wèi)生部牽頭的多部門人感染豬流感‘聯(lián)防聯(lián)控工作機(jī)制’，我們還有中醫(yī)――‘達(dá)菲’的主要成分就是‘八角茴香’。豬肉燉八角茴香，大家不妨一試！”

中醫(yī)專家認(rèn)為，甲型H1N1流感乃中醫(yī)所說(shuō)的“時(shí)癥”，并提倡“治未病”?！拔床　笔侵肝磥?lái)可能發(fā)生的疾病。中醫(yī)“治未病”起源于《黃帝內(nèi)經(jīng)》，如《素問(wèn)?四氣調(diào)神大論》指出：“圣人不治已病治未病，不治已亂治未亂，此之謂也?！薄鹅`樞?逆順》也提出“上工治未病，不治已病”。

中醫(yī)“治未病”具有豐富的內(nèi)涵，包括天人相應(yīng)、形神合一、辨證施養(yǎng)、平衡陰陽(yáng)、精神內(nèi)守、正氣為本6個(gè)方面，主張通過(guò)飲食、運(yùn)動(dòng)、精神調(diào)攝等個(gè)人養(yǎng)生保健方法和手段來(lái)維護(hù)人體的陰陽(yáng)平衡?！疤竦摕o(wú)，真氣從之；精神內(nèi)守，病安從來(lái)”，即通過(guò)精神調(diào)控，使真氣從順，從而使疾病不能發(fā)生或發(fā)展。“治未病”強(qiáng)調(diào)人們應(yīng)該注重保養(yǎng)身體、培養(yǎng)正氣、提高機(jī)體的抵御病邪能力，達(dá)到未生病前預(yù)防疾病的發(fā)生、生病之后防止進(jìn)一步發(fā)展、疾病痊愈以后防止復(fù)發(fā)的目的。

著名中醫(yī)張建明說(shuō)：“不管是非典，還是禽流感、甲型H1N1流感，本質(zhì)上都是病毒肆虐。”中醫(yī)所謂的“時(shí)疫”，是中國(guó)古代歷史上對(duì)流行性傳染病的統(tǒng)稱，它是由各種致病性微生物或病原體引發(fā)的傳染性疾病，自有人類社會(huì)以來(lái)，已不知發(fā)生過(guò)多少次，據(jù)在《中國(guó)救荒史》一書(shū)中的不完全統(tǒng)計(jì)，中國(guó)歷生疫災(zāi)的次數(shù)為：周代1次，秦漢15次，魏晉17次，隋唐17次，兩宋52次，元代20次，明代64次，清代74次。但人類都走過(guò)來(lái)了，因此不必太慌張，再怎么變化，也就是“致病性微生物或病原體”而已。中醫(yī)稱其為“外感”、“外邪”，一旦勝過(guò)了人體的正氣，人就得病，如果流行的規(guī)模夠大，那就是“時(shí)疫”，但每次總是人類戰(zhàn)勝它們，并且還產(chǎn)生了大師級(jí)的醫(yī)生，如漢末的瘟疫大流行，產(chǎn)生了張仲景、華佗；唐代的時(shí)疫產(chǎn)生了孫思邈；此后還有“金元四大家”、李時(shí)珍……

相關(guān)鏈接：現(xiàn)代中醫(yī)藥網(wǎng)：/

中醫(yī)預(yù)防方案

1.在生活起居方面，中醫(yī)認(rèn)為“虛邪賊風(fēng)，避之有時(shí)”、“食飲有節(jié)”、“起居有?！?，所以要及時(shí)添、減衣物，飲食、作息要有規(guī)律。

2.要相信科學(xué)知識(shí)，克服恐懼心理，保持平和心態(tài)。中醫(yī)認(rèn)為“精神內(nèi)守，病安從來(lái)”，“恐則氣下，驚者氣亂”，如若對(duì)流感產(chǎn)生恐懼之心，必導(dǎo)致氣機(jī)逆亂、氣郁化熱，產(chǎn)生毒熱之邪，更易招致外感。

3.盡量減少外出，尤其避免接觸流感樣癥狀（發(fā)熱、咳嗽、流鼻涕等）或有呼吸道疾病癥狀的病人；注意個(gè)人衛(wèi)生，經(jīng)常使用香皂和清水洗手，尤其是咳嗽和打噴嚏后；咳嗽或者打噴嚏時(shí)用紙巾遮住口鼻，然后將紙巾扔進(jìn)垃圾桶。

4.中藥外用：

凈化環(huán)境可采用以下方法。

（1）中藥噴灑：用石菖蒲、艾葉，按1∶1比例，以水煮沸15分鐘為宜，加水兌成含生藥，20％～30％的濃度。

（2）中藥熏蒸：①用石菖蒲、艾葉燒熏：按1∶1比例。②用食醋熏蒸：每立方米空間用食醋5～10毫升，加水一倍稀釋后加熱，每次熏蒸1～2小時(shí)。中藥熏蒸每天或隔天一次，需據(jù)疫情而定，以適中為宜。

5.中藥食療方：

（1）二白湯：蔥白15g、白蘿卜30g、香菜3g，加水適量，煮沸熱飲。

（2）薄荷梨粥：薄荷3g、鴨梨一個(gè)（削皮）、大棗6枚（切開(kāi)去核），加水適量，煎湯過(guò)濾；用小米或大米50g煮粥，粥熟后加入薄荷梨湯，再煮沸即可食用，平時(shí)容易“上火”的人宜吃。

（3）荸薺、百合、梨等具有清熱生津的作用，可以適當(dāng)食用。

（4）鮮馬齒莧30～60g，蒜汁加醋涼拌或蘸醬吃。

（5）赤小豆、綠豆適量熬湯服用。

（6）百合20g、薏苡仁15g、八角茴香2枚、鮮藕100g、瘦肉250g，煲湯，食肉飲湯，經(jīng)常食用具有滋陰潤(rùn)肺、提高肌體免疫力的功效。注意：百合為寒潤(rùn)之品，風(fēng)寒咳嗽、脾虛便溏者要慎用。

美國(guó)公布抗流感“食譜”

日前，美國(guó)MSNBC新聞網(wǎng)向公眾推薦了9種食物，用于預(yù)防、阻擊甲型H1N1流感。普通的食物真的可以成為一個(gè)盾牌，保護(hù)人們不受流感侵襲嗎？

營(yíng)養(yǎng)食療

■酸奶：“益生菌可以保護(hù)腸道。有些酸奶中含有的乳酸菌可促進(jìn)血液中白血球的生長(zhǎng)。”

■紅薯：“紅薯能增強(qiáng)皮膚抵抗力。皮膚也是人體免疫系統(tǒng)的一員，維生素A在皮膚結(jié)締組織中起著重要作用。補(bǔ)充維生素A最好的辦法就是從食物中獲取β-胡蘿卜素?！?/p>

■茶：“茶具有抗細(xì)菌、防流感的功效。哈佛大學(xué)免疫學(xué)者發(fā)現(xiàn)，連續(xù)兩周每天喝5杯紅茶的人，體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生大量抗病毒干擾素，這種可抵抗感染的蛋白能幫助人抵御流感。”

■雞湯：“雞湯是美味的感冒藥。雞肉在烹飪中釋放出的半胱氨酸，與治療支氣管炎的藥物非常相似，有鹽分的雞湯可以減輕痰多的癥狀?！?/p>

■牛肉：“補(bǔ)鋅增強(qiáng)免疫力。鋅在飲食中非常重要，可促進(jìn)白血球生長(zhǎng)，進(jìn)而幫助人體防范病毒、細(xì)菌等有害物質(zhì)，即使輕微缺鋅也會(huì)增加患傳染病風(fēng)險(xiǎn)。牛肉是補(bǔ)鋅的重要來(lái)源，所以吃牛肉能預(yù)防流感?！?/p>

■蘑菇：“促進(jìn)白血球抗感染。人們一直就把蘑菇當(dāng)做提高免疫力的食物，現(xiàn)在研究發(fā)現(xiàn)，吃蘑菇可促進(jìn)白血球的產(chǎn)生、活動(dòng)，讓它們更具防范性?！?/p>

■魚(yú)和貝類：“補(bǔ)硒防病毒。硒主要來(lái)源于牡蠣、龍蝦、螃蟹、蛤蜊等海鮮?！?/p>

■大蒜：“大蒜能抗感染和細(xì)菌。英國(guó)研究人員實(shí)驗(yàn)表明，食用大蒜可讓感冒發(fā)生幾率降低2/3?！?/p>

■燕麥和大麥：“康纖維抗氧化。燕麥和大麥都含有抗菌和抗氧化的物質(zhì)。食用燕麥、大麥可增強(qiáng)免疫力，加速傷口愈合，還能幫助抗生素產(chǎn)生更佳效果?！?/p>

相關(guān)鏈接：美國(guó)MSNBC新聞網(wǎng)：/

參考書(shū)目

①《黃帝內(nèi)經(jīng)》是中國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)四大經(jīng)典著作之一，也是第一部冠以中華民族先祖“黃帝”之名的傳世巨著，是我國(guó)醫(yī)學(xué)寶庫(kù)中現(xiàn)存成書(shū)最早的一部醫(yī)學(xué)典籍。

②《丹溪心法》是綜合性醫(yī)書(shū)。5卷（或?yàn)?卷）。元?朱震亨著述，明?程充校訂。

③《瘟疫論》。吳有性于崇禎十五年(1642)撰成，據(jù)《四庫(kù)全書(shū)總目》載，《瘟疫論》2卷，補(bǔ)遺1卷，版本主要有清初刻本、四庫(kù)全書(shū)本等。上卷載論文50篇，闡述瘟疫之病因、病機(jī)、癥候、治療，并從多方面論述瘟疫與傷寒的不同。下卷載文36篇，著重論述瘟疫的兼癥，有數(shù)篇論述瘟疫名實(shí)和疫疬征治。

④《太平惠民和劑局方》是宋代官修方書(shū)。此書(shū)包括名方很多，諸如至寶丹、牛黃清心丸、蘇合香丸、藿香正氣散、婦科逍遙散、失笑散、膠艾湯、兒科肥兒丸、小抱龍丸等，自北宋末至元代的200年中，民眾應(yīng)用很廣。